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光散射與細胞化學技術聯合應用于白細胞分類計數：聯合應用激光射的過氧化物酶染色技術來進行白細胞分類計數。嗜酸性粒細胞有很強的過氧化物酶活性，中性粒細胞有較強的過氧化物酶活性，單細胞資助之，而淋巴細胞和嗜堿性粒細胞均無此酶。

將血興高采烈經過氧化物酶染色后，胞質內即可出現不同的酶化學反應，由此構成了此種血液分析儀的分析基礎，化妝品的分血器將血加入到含有清洗劑和甲醛的高滲液體內（21倍稀釋）并孵育（400～700）20秒鐘。其中清洗劑（含有非離子表面活性劑）使細胞破壞，甲醛使白細胞質內酶被固定，此后發生第二步反應，即加入過氧化氫和4氯=蔡酚，并加熱13秒，此時如果待測細胞質中含有過氧化酶即可分解H2O2產生[O]，后者可使4氯-蔡酚顯色并沉積定位于酶反應部位，此類細胞通過測試區時，由于酶反應強度不同（陰性、弱陽性、強陽性）和細胞體大小不同，激光束射互細胞上的前向角和散射角有所不同，以X軸為吸光率標記（酶反應強度），Y軸為光散射（細胞大小）。每個細胞產生的兩個信號結合定位在細胞圖上（圖2-18）。每秒鐘儀器可測上千個細胞。計算機系統對存儲的資料進行分析處理，并結合嗜好堿性粒細胞或分葉核粒細胞通道結果計算出白細胞總參數和分類良數。

圖2-18 激光與細胞化學聯合檢測白細胞直方示意圖

4．多角度偏振光散射白細胞分類技術（multi — Angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS）其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內部結構近似于自然狀態，因嗜堿性粒細胞嘌粒具有吸濕的特性，所以嗜堿性粒細胞的結構有輕微改變。紅細胞內部的滲透透壓高于鞘興高采烈的滲透壓而發生改變，紅細胞內的血紅蛋白從細胞內游離出來，而鞘液內的水分進入紅細胞中，細胞膜的結構仍然完整，但此時的紅細胞折炮指數與鞘液的相同，故紅細胞不干擾白細胞檢測。

在水動力系統的作用下，樣本被集中為一個直徑為30μm的小股液流，該液流將稀釋細胞單個排列，因是單個通過激光束，故在各個方向都有其散射光。可以從四個角度測定散射光的密度（見圖2-19）：①00：前角光散射（10～30）粗略地測定細胞大小；②100：狹角光散射（70～110）測細胞結構及其復雜性的相對特征；③900：900消偏振光散射（700`～1100），基于顆粒可以將垂直角度的偏振激光消偏振的特性，將嗜酸細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。④900：垂直光散射（700～1100）主要對細胞內部顆粒和細胞成分進行測量。可以從這四個角度同時對個白細胞進行測量，同一種特定的程序自動儲存和分析數據，將白細胞分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。

圖2-19 MAPSS測量原理